铁皮石斛当归复方提取液对2型糖尿病小鼠降糖作用研究

2018-05-28 16:33:29 发表

文章来源:浙江中医杂志2017年5月第52卷第5期:371-372

文章作者:戴明珠1王楠楠1徐俞悦1苏洁2颜美秋2吕圭源2陈素红1’2

1 温州医科大学 浙江温州325035

2 浙江中医药大学 浙江杭州310053

3 浙江工业大学 浙江杭州310014

 

关键词铁皮石斛当归复方提取液 链脲佐菌素 2型糖尿病 小鼠 实验研究

 

糖尿病(DM)是一组以高血糖为特征的终身性代谢疾病,易导致肾、眼、心脏、血管、神经的慢性损害和功能障碍。中医对糖尿病的认识始于《素问·阴阳别论》:二阳结谓之消。《金匮要略》:病者如热状,烦渴,口干燥而渴,其脉反无热,此为阴伏,是瘀血也即瘀可致消。《诸病源候论·消渴候》则以消渴为病证总名。现代中医对糖尿病的治则为益气养阴、活血化瘀。本实验根据国家食品药品监督管理局(CFDA)《辅助降血糖功能评价方法》,将养阴药铁皮石斛与养血活血药当归联用,观察铁皮石斛当归复方提取液对高糖高脂加链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病小鼠降血糖作用。

1材料与方法

11 药物:铁皮石斛由浙江杏彩体育官网app提供,当归由浙江中医药大学中药饮片厂提供。铁皮石斛当归复方提取液(TDF)即铁皮石斛、当归经水提取后配制成含生药量0.150.30.69Ⅲ濒药液。

12动物:ICR小鼠,雄性,20—229,浙江省实验动物 中心提供,许可证号scxK()2014—0001

13试剂:链脲佐菌素(STZ,批号s0130sigma公司);高糖高脂饲料(浙江省实验动物中心);葡萄糖(GLu)(批号l0010518,国药集团化学试剂有限公司);葡萄糖试剂盒,批号15110201;甘油叁酯(TG)试剂盒,批号 15121501;总胆固醇(TC)试剂盒,批号1511040l,宁波康美生物科技有限公司;胰岛素(INs)测试盒,批号 20160103,上海源叶生物科技有限公司。

14仪器:TBA40FR全自动生化分析仪(东芝医疗系统株式会社)Powerwave 340酶标仪(叠颈辞—罢贰碍公司);雅培安妥超越血糖仪、血糖试纸(Abbott公司)

15正常小鼠降糖实验:IcR小鼠分为正常对照组和TDF(609kg)组,每组15只。分别灌纯化水与提取液,连续30d,末次给药后禁食4h,测空腹血糖(FBG)值。

16  2型糖尿病模型小鼠降糖实验:分述如下。

161造模与给药:雄性IcR小鼠分为正常对照组、模型对照组和TDF(1530609kg)组,每组15只。TDF 组灌规定浓度提取液,模型对照组灌纯化水,连续30d。各组给予普通饲料,1周后模型对照组和TDF组更换高糖高脂饲料,喂饲3周后,模型对照组和3个剂量禁食24h,给予1STz 80mgkg Bw腹腔注射,注射后继续给予高糖高脂饲料5天。实验结束。

162 FBG、口服葡萄糖耐量(0GTT):末次给药后禁食4h,测定空腹血糖即给葡萄糖前(0h)血糖值和血糖曲线下面积,各组按规定给药,15min后灌予葡萄糖 2.59kg Bw,测定给葡萄糖后0.52h的血糖值及血糖 曲线下面积。血糖曲线下面积(Auc)=(0h血糖值+0.5h 血糖值)×0.52+(2h血糖值+0.5h血糖值)×1.52

163总胆固醇(Tc)、甘油叁酯(TG):末次给药后禁食4h,检测血清TcTG水平。

164胰岛素(INs)、胰岛素抵抗指数(IR):末次给药后禁食4h,检测INs水平,并计算IR

17统计学方法:计量资料数据以戈±s表示,组间比较采用f检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。

 

 

2结果

21 对正常小鼠体重及空腹血糖的影响:TDF 609kg 对正常小鼠体重及空腹血糖无明显影响。见表1

 

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222型糖尿病小鼠FBGOGTTAuC的影响:与正常对照组比较,给予葡萄糖00.52h,模型对照组血糖值及Auc均显着升高(P<0.01);与模型对照组比较,TDF1.53.09kg组各时间点血糖值及AuC均呈下降趋势,0.05)。提示TDF 1.59kg可降低糖尿病小鼠空腹及餐 其中1.59kg02h血糖值及AUc明显下降(P< 2h血糖值,并提高糖耐量。见表2

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232型糖尿病小鼠TCTG水平的影响:与正常对照比较,模型对照组血清TcTG水平显着升高(P<0.01);与模型对照组比较,TDF 1.59kgTcTG水平均呈下降趋势,其中TC水平明显降低(P<0.05)。提示TDF 1.59kg具有降低糖尿病小鼠血清Tc功能。见表3

 

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242型糖尿病小鼠INsIR的影响:与正常对照组比较,模型对照组IR显着升高(P<001);与模型对照组比较,TDF 1.59kgIR明显下降(P<0.05)。提示TDF 1.5gkg可提高糖尿病小鼠靶组织对胰岛素的敏感性。见表4

 

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3讨论

铁皮石斛味甘,性偏寒,具有滋阴、清热、润燥作用,用于高热、内热消渴者,脾胃虚寒的糖尿病患者则不宜连续服用;当归味甘,性温,为补血活血之要药。铁皮石斛佐以当归,一可起到相成作用,发挥补血活血之作用,直达病所;二加强或与铁皮石斛共同发挥降糖作用,增强药效;叁以消除或减缓石斛的寒性,增加适应症、扩大应用人群。二药均为可用于保健食品的中药材(见卫生部2014版《药食同源目录》)

 

造模前,小鼠精神状况良好,毛色光泽均匀,饮食饮水及大小便正常;造模后,模型组逐渐出现精神萎靡,掉毛,多饮,小便异味,个别出现皮肤溃烂等感染现象;TDF组较模型组状态佳。模型对照组0.5h血糖值≥ 10mmolL,且较正常对照组0.52h血糖均升高,AUC升高,差异有显着性,判定模型糖代谢紊乱成立,在此基础上,模型对照组IR明显升高,差异有显着性,判定胰岛素抵抗糖/脂代谢紊乱模型成功。提示STZ可能仅损伤部分胰岛B细胞,剩余部分可代偿性分泌胰岛素,使其水平不降低,但组织对INS敏感性和反应性降低,不能摄取、储存和利用葡萄糖,即出现糖尿病症状。经TDF治疗后,糖尿病小鼠对INS敏感性增加,OGTT提高,餐后血糖值降低,提示TDF2型糖尿病小鼠的降糖机制与改善胰岛素抵抗有关。

中药对复杂疾病的治疗一直具有其独特的作用和优势:不单改善症状,更能全面调理人体机能,恢复血管弹性,增加心、肝、肾、视网膜等组织营养性血流量,克服化学合成药的副作用和诱发的并发症;中药复方多成分、多靶点、多种作用机制的特征符合复杂疾病的治疗要求。可见,中医药治疗糖尿病值得进一步研究。