4种石斛的多糖对高血压大鼠降血压的影响

2018-06-01 10:10:04 发表

文章来源:热带作物学报2017,38(9):1764-1768

文章作者:王再花1,叶庆生2,李杰1,章金辉1,徐晔春1

1 广东省农业科学院环境愿意研究所 广东省园林花卉种质创新综合利用重点实验室 广东广州 510640

2 华南师范大学生命科学学院,广东广州 510631

 

摘要 以铁皮石斛、金钗石斛、大苞鞘石斛和春石斛品种( Dendrobium Second LoveTokimeki)为试材,研究4种石斛茎段的不同纯度多糖(粗多糖CDPs、精多糖DPPs和纯化多糖水洗组分DPPs-)对自发性高血压大鼠(SHR)体内降血压效果的影响。结果表明,4种石斛的不同纯度多糖均对SHR具有降血压的效果,且处理时间越长效果越显着,处理240min后均显着优于阳性对照硝苯地平。金钗石斛多糖水洗组分(DNPP-240min内降血压效果好于其对应的粗多糖和精多糖,而铁皮石斛、大苞鞘石斛和春石斛品种D. Second Love Tokimeki的各多糖间降血压效果差异不显着。4种石斛DPPs-间降血压作用无显着差异。本研究显示石斛多糖具有一定

的降血压活性,其中纯化多糖水洗组分DPPs-I具有较好的降血压效果,药用开发前景良好。

关键词 石斛;多糖;高血压大鼠;降血压活性

 

石斛是我国传统名贵的中药材,其中铁皮石斛( Dendrobium officinale)的干燥茎,金钗石斛

( Dendrobium nobile)、鼓槌石斛( Dendrobiumchrysotoxum)或流苏石斛( Dendrobium fimbriatum)的栽培品及其同属植物近似种的新鲜或干燥茎被2010年版《中国药典》收载,认为其具有益胃生津、滋阴清热功效叫。而多糖是石斛的主要活性成分之一,其分离纯化和药理活性研究成为近年的热点之一。大苞鞘石斛( Dendrobium wardianum)为我国分布区域狭窄的濒危石斛,在民间被加工成“扁黄草”,作为滋阴、强身等功效的中药材广泛入药,近年来笔者探明大苞鞘石斛多糖含量高(34.1%),与铁皮石斛相比,具有更好的抗氧化活性,药用开发前景良好。春石斛栽培品种主要用于盆栽观赏,笔者前期研究发现许多春石斛品种多糖含量和生物碱含量较高,具有较好的抗氧化活性,其中高多糖(23.7%)的春石斛品种 Dendrobium Second Love Tokimeki’茎段多糖含量达23.7%,但目前有关石斛纯化多糖降血压作用的报道甚少,主要涉及的是铁皮石斛粗多糖、枫斗冲剂、复方制剂等。本研究则以传统的铁皮石斛和金钗石斛为对照材料,比较大苞鞘石斛和栽培品种D. Second loveTokimeki’在降血压活性方面与二者的差异,以期为石斛资源的开发和药用药效研究提供参考。

 

1材料与方法

11材料

供试材料为铁皮石斛(组培繁育而来的云南铁皮石斛实生苗)、金钗石斛(云南引进)、大苞鞘石斛(云南引进)及春石斛栽培品种(日本引|),经广东省农业科学院环境园艺研究所朱根发研究员鉴定。自发性高血压大鼠(SHR),SPF,(300±20)g,由南方医科大学动物中心提供;硝苯地平,上海现代哈森药业有限公司提供,用生理盐水配制成2mg/mL

1.2方法

1.2.1多糖的分离纯化取干燥至恒重的铁皮石斛、大苞鞘石斛、金钗石斛和D. Second Love

罢辞办颈尘别办颈’4种石斛茎段,参考笔者前期报道的方法,用热水浸提法和醇沉法分别提取得到4种石斛粗多糖DCPs,分别命名为DOCPDWCPDNCPDHCP;Sevag去蛋白法进一步纯化得到4种石斛精多糖DPPs,分别命名为DOPPDwPPDNPPDHPP;然后通过DEAE

颁别濒濒耻濒辞蝉别-52阴离子交换柱层析进行分级,分别得到4个水洗组分DPPs-I,分别命名为DOPP-I

我:顿奥笔笔-滨、DNPP-IDHPP-I

1.2.2小鼠降血压试验参考龚受基等的方法设立阳性对照组硝苯地平,剂量002g/kg;生理盐水组(CK);多糖组(铁皮石斛DOCP,DOPPDOPP-I;大苞鞘石斛DWCP,DWP,DWPP-I;金钗石斛DNCP,DNPP,DNPP-1;春石斛品种DHCP, DHPP, DHPP-1),剂量均为2.0gkg。每组10只。试验前禁食12h,麻醉前30min灌胃给药1,以戊巴比妥钠30mg/kg腹腔麻醉,常规气管插管,颈动脉插管后经压力换能器连接BL生物机能试验系统,记录血压变化。测给药后240mi内血压变化值(收缩压)

1.3统计分析

数据整理采用 Excel2010软件,分析软件为SAS81,分别对同一处理组内不同处理时间的血压值,同一处理时间内各处理组的血压值进行单因素方差分析

 

2结果与分析

由表1可以看出,生理盐水组各处理时间内血压无显着差异,阳性对照组(硝苯地平)处理80min时即可显着降低血压,而随后处理的200min内血下降幅度较小,240min时达显着差异。铁皮石斛的3个多糖组(DOCP组、DOPP组和DOPP-I)均在处理120min后才与生理盐水组(CK)差异显着,随着处理时间的延长,血压显着下降,且在240min时降血压效果最好,3个多糖组的降血压效果均显着优于阳性对照和生理盐水组,3个多糖组间无显着差异,大苞鞘石斛多糖方面,3个多糖组(DWCPDWPP组和DWPP-I)同样在处理120min后才与生理盐水组差异显着,且随着处理时间的延长,血压显着下降。3种多糖组之间对大鼠降血压的效果无显着差异性,但在处理240min,均显着优于阳性对照硝苯地平(2)。金钗石斛多糖方面,3个多糖组(DNCP组、DNPP组和DNPP-I)同样在处理120min后才与生理盐水组差异显着,且随着处理时间的延长,血压显着下降,至处理160min,金钗石斛DNCP降血压效果显着优于其他2种多糖,并与阳性对照组效果相当。而在处理240min,DNPP-I组降血压效果均要优于DNCP组和DNPP,但与DNCP组差异不显着,3者均显着优于阳性对照硝苯地平(3)。春石斛品种D. Second LoveTokimeki’的多糖降血压效果见表43个多糖组(DHCP组、DHPP组和DHPP-I)的变化趋势与铁皮石斛多糖和大苞鞘石斛多糖完全相同,且在240min时显着优于阳性对照硝苯地平。可以看出,除了生理盐水组(CK),无论是阳性对照组(硝苯地平)还是各多糖组,在给药后,随着时间的增加,其对大鼠降血压的作用越来越好,至处理240min,均具有显着差异性。阳性对照组(硝苯地平)在短时间给药效果好于多糖组(1-4),当给药80min,血压迅速降低到1586 mmHg,即时效应明显;但随着处理时间的延长,大鼠血压下降不明显,240min时才达到显着差异。而多糖组处理80min,大鼠血压没有显着下降;但随着作用时间的增加,多糖组降血压效果越来越好,具有显着差异,说明多糖组降血压作用,在定作用时间范围内,具有一定的时间依赖性。比较4种石斛的纯度最高的多糖水洗组分的降血压效果,发现它们在处理240min时均优于阳性对照。

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3讨论

中医认为高血压属“头痛”、“眩晕”等范畴临床辨证按病机常分为肝火亢盛、阴虚阳亢、阴阳两虚及痰湿雍盛等。一些学者认为,石斛作为种滋阴的中药,对降血压可以起到一定的作用。为探明其降血压的物质,本研究发现,所选用的4种石斛的多糖均对SHR大鼠具有降血压的效果其中以纯度较高的多糖水洗组分更佳,最高可将血压从200mmHg降至1334mmHg,而笔者通过单糖分析,发现这4种石斛的多糖主要由核糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,且以甘露糖和葡萄糖为主要单糖(数据未发表),可见,这些糖类成分具有一定的降血压作用。

吴人照等-研究表明铁皮石斛粗多糖大、中、小剂量均对SHR-sp大鼠有一定降压作用,表明多糖为铁皮石斛降血压、预防中风作用的主要有效成份,而铁皮石斛非多糖降压效果较弱。本文与其结果一致,笔者所选定的粗多糖、精多糖及多糖水洗组分均具有较好的降血压效果。金钗石斛方面,前人主要报道了水煎液对大鼠肠系膜的动脉血管有扩张作用叫,而其纯化多糖对降血压的影响还未见报道,本文对其结果进行了补充,发现金钗石斛各提取多糖在240min内降血压效果均明显好于阳性对照硝苯地平,且以纯化的多糖DNPP-I效果最好。

许多文献报道西药治疗高血压效果比较显着,但也带来一定副作用,而含石斛的中药配方降压作用缓和,稳定血压效果好。本研究表明,阳性对照组硝苯地平降血压在80min内便有显着效果,这与王丹报道硝苯地平治疗高血压的即时效应致,静脉注射硝苯地平1mg治疗31例重症高血压患者,30min时血压下降幅度最大,作用持续约2h。而与阳性对照组相比,石斛多糖降血压是一个缓慢而持续有效的过程,240min内降血压效果明显要好。此外,从不同纯化多糖降血压效果来看,在处理240min,大苞鞘石斛、铁皮石斛和春石斛品种D. Second LoveTokimeki’的多糖虽然随着纯度的提高,血压下降幅度略微大些,但各多糖差异未达到显着水平,说明降血压作用与这3种石斛的多糖纯度间正相关性不明显,可能粗多糖中还有其他物质影响着降血压活性;而金钗石斛水洗多糖组分DNPP-I降血压效果优于DNCPDNPP(1-4),但与其他3种石斛多糖水洗组分无显着差异(1)。可见,上述4种石斛多糖对治疗高血压均具有一定的效果,且副作用小,具体通过何种机理发生作用,还有待进一步研究。

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